《白樺抗旱耐鹽和次生壁形成的分子機(jī)理》首先進(jìn)行BplMYB46轉(zhuǎn)錄因子的核定位；分析該基因是否被脅迫誘導(dǎo)以及在不同部位的表達(dá)。克隆啟動(dòng)子，進(jìn)行順式元件分析，檢測(cè)其活性；構(gòu)建過(guò)表達(dá)和抑制表達(dá)載體，轉(zhuǎn)基因后進(jìn)行脅迫處理，根據(jù)表型、組化、生理指標(biāo)、解剖學(xué)以及SOD等基因的表達(dá)確定BplMYB46基因是否具有抗逆性和在調(diào)控次生壁形成中的功能；分析其是否有轉(zhuǎn)錄激活活性以及與同源的白樺MYB的互作：構(gòu)建隨機(jī)元件庫(kù)，酵母單雜交篩選與其互作的元件；利用表達(dá)譜技術(shù)分析BplMYB46調(diào)控的下游代謝途徑及靶基因。最后，確定白樺BplMYB46基因在響應(yīng)非生物脅迫和次生細(xì)胞壁形成中的功能及調(diào)控機(jī)制，為白樺的遺傳改良奠定基礎(chǔ)。
《白樺抗旱耐鹽和次生壁形成的分子機(jī)理》可供林學(xué)專(zhuān)業(yè)的高年級(jí)本科生、研究生學(xué)習(xí)參考，也可以作為林業(yè)院校和師范院校林木遺傳育種、分子生物技術(shù)等相關(guān)專(zhuān)業(yè)研究生的科研參考書(shū)。
前言
1 緒論
1.1 植物基因啟動(dòng)子的研究進(jìn)展
1.1.1 啟動(dòng)子的結(jié)構(gòu)和功能
1.1.2 啟動(dòng)子的分類(lèi)
1.2 植物轉(zhuǎn)錄因子的研究
1.2.1 轉(zhuǎn)錄因子的結(jié)構(gòu)和分類(lèi)
1.2.2 轉(zhuǎn)錄因子的活性
1.2.3 轉(zhuǎn)錄因子的功能
1.2.4 MYB轉(zhuǎn)錄因子的研究進(jìn)展
1.3 本研究的目的和意義
2 白樺BplMYB46基因的表達(dá)研究
2.1 實(shí)驗(yàn)材料
2.1.1 植物材料
2.1.2 載體與菌株
2.1.3 主要試劑
2.1.4 藥品及培養(yǎng)基制備
2.2 實(shí)驗(yàn)方法
2.2.1 BplMYB46轉(zhuǎn)錄因子的亞細(xì)胞定位
2.2.2 白樺BplMYB46基因分析
2.2.3 白樺BplMYB46基因的表達(dá)
2.2.4 BplMYB46啟動(dòng)子序列分析
2.2.5 BplMYB46啟動(dòng)子的時(shí)空表達(dá)分析
2.3 結(jié)果與分析
2.3.1 BplMYB46轉(zhuǎn)錄因子的亞細(xì)胞定位
2.3.2 白樺BplMYB46基因分析
2.3.3 白樺BplMYB46基因的表達(dá)
2.3.4 pCAMBIAl301-BplMYB46啟動(dòng)子序列元件分析
2.3.5 BplMYB46啟動(dòng)子的時(shí)空表達(dá)
2.4 討論
2.5 本章小結(jié)
3 白樺BplMYB46基因的功能研究
3.1 實(shí)驗(yàn)材料
3.1.1 植物材料
3.1.2 載體與菌株
3.1.3 試劑
3.1.4 溶液及培養(yǎng)基制備
3.2 實(shí)驗(yàn)方法
3.2.1 BplMYB46基因植物過(guò)表達(dá)載體的構(gòu)建和工程茵的制備
3.2.2 BplMYB46基因?qū)Π讟宓倪z傳轉(zhuǎn)化
3.2.3 BplMYB46轉(zhuǎn)基因白樺在非生物脅迫下的抗逆分析
3.2.4 BplMYB46基因在白樺次生壁合成中的功能分析
3.3 結(jié)果與分析
3.3.1 BplMYB46基因植物表達(dá)載體的構(gòu)建和工程茵的制備
3.3.2 轉(zhuǎn)基因白樺的篩選與檢測(cè)
3.3.3 BplMYB46轉(zhuǎn)基因白樺苗非生物脅迫下的抗逆分析
3.3.4 勵(lì)lMYB46基因在白樺次生壁合成中的功能分析
3.4 討論
3.5 本章小結(jié)
4 BplMYB46轉(zhuǎn)錄激活結(jié)構(gòu)域和同源蛋白的互作研究
4.1 實(shí)驗(yàn)材料
4.1.1 菌株與載體
4.1.2 常用試劑
4.1.3 藥品及培養(yǎng)基制備
4.2 實(shí)驗(yàn)方法
4.2.1 BplMYB46轉(zhuǎn)錄因子轉(zhuǎn)錄激活結(jié)構(gòu)域的研究
4.2.2 BplMYB46轉(zhuǎn)錄因子與同源基因互作的研究
4.3 結(jié)果與分析
4.3.1 BplMYB46轉(zhuǎn)錄因子轉(zhuǎn)錄激活結(jié)構(gòu)域分析
4.3.2 BplMYB46轉(zhuǎn)錄因子與同源蛋白的互作
4.4 討論
4.5 本章小結(jié)
5 BplMYB46識(shí)別順式作用元件的研究
5.1 實(shí)驗(yàn)材料
5.1.1 菌株與載體
5.1.2 主要試劑
5.1.3 藥品及培養(yǎng)基制備
5.2 實(shí)驗(yàn)方法
5.2.1 BplMYB46識(shí)別順式作用元件的研究
5.2.2 BplMYB46與順式作用元件的互作驗(yàn)證
5.2.3 染色質(zhì)免疫共沉淀(ChIP)技術(shù)分析BplMYB46與下游基因的互作
5.3 結(jié)果與分析
5.3.1 BplMYB46識(shí)別順式作用元件的分析
5.3.2 BplMYB46與順式作用元件互作分析
5.3.3 ChIP實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析
5.4 討論
5.5 本章小結(jié)
6 BplMYB46調(diào)控下游基因的表達(dá)分析
6.1 實(shí)驗(yàn)材料
6.1.1 植物材料
6.1.2 常用試劑
6.1.3 溶液配制
6.2 實(shí)驗(yàn)方法
6.2.1 RNA的提取與反轉(zhuǎn)錄
6.2.2 數(shù)字基因表達(dá)譜文庫(kù)的構(gòu)建和測(cè)序
6.2.3 數(shù)據(jù)的處理
6.2.4 測(cè)序評(píng)估
6.2.5 基因表達(dá)量統(tǒng)計(jì)
6.2.6 差異表達(dá)基因篩選
6.2.7 RT-PCR方法驗(yàn)證表達(dá)譜測(cè)序結(jié)果
6.3 結(jié)果與分析
6.3.1 表達(dá)譜測(cè)序結(jié)果評(píng)估
6.3.2 差異表達(dá)基因分析
6.3.3 RT-PCR驗(yàn)證表達(dá)譜結(jié)果
6.4 討論
6.5 本章小結(jié)
7 討論與展望
7.1 討論
7.2 展望
參考文獻(xiàn)
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