本書介紹了常用的分子生物學(xué)和基因工程實(shí)驗(yàn)技術(shù)。全書分為三部分，第一部分為基礎(chǔ)性實(shí)驗(yàn)，介紹了一些簡明且獨(dú)立的實(shí)驗(yàn)方案，每個(gè)實(shí)驗(yàn)可在半日內(nèi)完成，且成功率高，因此特別適用于有關(guān)專業(yè)的本科實(shí)驗(yàn)教學(xué)；第二部分為綜合性實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)略微復(fù)雜，適用于有一定基礎(chǔ)的高年級本科生實(shí)驗(yàn)教學(xué)；最后一部分為研究型實(shí)驗(yàn)，為培養(yǎng)學(xué)生的獨(dú)立科研工作能力提供了更加貼近科研工作的實(shí)驗(yàn)方案
第三版前言
第一部分 基礎(chǔ)性實(shí)驗(yàn)
實(shí)驗(yàn)1 質(zhì)粒的分離——堿裂解法
實(shí)驗(yàn)2 Silica硅石粉法純化質(zhì)粒
實(shí)驗(yàn)3 吸附膜方法提取質(zhì)粒DNA
實(shí)驗(yàn)4 核酸瓊脂糖凝膠電泳及“玻璃奶”法純化回收DNA片段
實(shí)驗(yàn)5 吸附膜方法回收瓊脂糖凝膠中DNA片段
實(shí)驗(yàn)6 DNA片段的連接（向質(zhì)粒載體中插入外源DNA）
實(shí)驗(yàn)7 大腸桿菌感受態(tài)細(xì)胞的制備、轉(zhuǎn)化及轉(zhuǎn)化子的鑒定（藍(lán)白斑篩選法）
實(shí)驗(yàn)8 聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）技術(shù)
實(shí)驗(yàn)9 PCR產(chǎn)物連入T載體
實(shí)驗(yàn)10 菌落PCR方法快速篩選細(xì)菌重組子
實(shí)驗(yàn)11 重組子的插入方向鑒定（酶切法）
實(shí)驗(yàn)12 噬菌體鋪板
實(shí)驗(yàn)13 M13噬菌體DNA的提取
實(shí)驗(yàn)14 SDS法小量提取植物基因組DNA
實(shí)驗(yàn)15 CTAB法小量提取植物基因組DNA
實(shí)驗(yàn)16 動(dòng)物組織細(xì)胞基因組DNA提取
實(shí)驗(yàn)17 血液基因組DNA的純化分離
實(shí)驗(yàn)18 Trizol試劑快速提取（動(dòng)）植物總RNA
實(shí)驗(yàn)19 離心柱型方法純化植物組織總RNA
實(shí)驗(yàn)20 植物啟動(dòng)子表達(dá)分析——β 葡萄糖醛酸糖苷酶（GUS）組織化學(xué)染色
第二部分 綜合性實(shí)驗(yàn)
實(shí)驗(yàn)21 反轉(zhuǎn)錄PCR
實(shí)驗(yàn)22 谷胱甘肽S 轉(zhuǎn)移酶融合蛋白質(zhì)的表達(dá)及純化
實(shí)驗(yàn)23 （His）6標(biāo)記蛋白質(zhì)的原核表達(dá)和純化
實(shí)驗(yàn)24 Western-blotting分析
實(shí)驗(yàn)25 化學(xué)發(fā)光Western-blotting分析
第三部分 研究性實(shí)驗(yàn)
實(shí)驗(yàn)26 地高辛標(biāo)記探針的Southern雜交
實(shí)驗(yàn)27 菌落原位雜交
實(shí)驗(yàn)28 轉(zhuǎn)基因植物的PCR檢測
實(shí)驗(yàn)29 花序浸泡法轉(zhuǎn)化擬南芥及轉(zhuǎn)化子的篩選
實(shí)驗(yàn)30 葉盤法轉(zhuǎn)化煙草
實(shí)驗(yàn)31 PCR引物的電子設(shè)計(jì)
主要參考文獻(xiàn)
《分子生物學(xué)及基因工程實(shí)驗(yàn)教程（第三版）》：
第一部分 基礎(chǔ)性實(shí)驗(yàn)
實(shí)驗(yàn)1 質(zhì)粒的分離——堿裂解法
【實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹?br />
1.學(xué)習(xí)堿法分離質(zhì)粒的基本原理。
2.掌握堿法分離質(zhì)粒的操作方法。
【實(shí)驗(yàn)原理】
質(zhì)粒是染色體之外裸露的、具有自主復(fù)制能力的、以超螺旋狀態(tài)存在于細(xì)胞內(nèi)的雙鏈DNA 分子。質(zhì)粒的分離是分子生物學(xué)研究中最基本的技術(shù)，目前提取質(zhì)粒的方法很多，比如CsCl梯度離心法、煮沸法、硅石粉法、堿裂解法等。本實(shí)驗(yàn)所用的堿裂解法是一種經(jīng)典的分離質(zhì)粒DNA 的方法，其基本原理是利用染色體DNA 與質(zhì)粒DNA 在變性程度和復(fù)性速度的差異，即在pH>12的堿性條件下，大腸桿菌的基因組DNA 氫鍵斷裂，雙螺旋結(jié)構(gòu)解開而變性，但在該條件下，質(zhì)粒因其具有共價(jià)閉合環(huán)狀超螺旋結(jié)構(gòu)的特點(diǎn)，兩條互補(bǔ)鏈間的氫鍵沒有完全被破壞，兩條鏈仍然部分地結(jié)合在一起；當(dāng)溶液的pH 回復(fù)至中性時(shí)，質(zhì)粒DNA 快速復(fù)性，但是染色體DNA 由于分子很大，難以復(fù)性；在高鹽
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