免疫學與微生物學是臨床醫學、預防醫學、藥學、中藥學和生命科學各專業學生的兩門重要專業基礎課程。免疫學與微生物學的理論體系是在長期科學實驗基礎上建立和發展的，其實踐性很強。因此，實驗課教學是加強理論課教學、提高教學質量的重要環節。進入21世紀后，這兩門課程的教材已經更換為面向新世紀的新版教科書。為了配合新教材，充實實驗教學內容，使學生有一本內容較全面、實用性較強的實驗課教材，我們對《微生物學與免疫學實驗教程》進行了改版（第2版），以便更好地滿足臨床醫學、預防醫學、藥學、中藥學和生物技術各專業的本、專科學生的使用要求。新版教材在忠于第1版編寫原則的基礎上，主要體現以下幾個新特點。
（1）加強細節處理，進一步提高實驗內容的操作性和實用性。本教材所編寫的實驗均由編者多次全程親自動手操作，同時結合了多年教學科研的實踐經驗，對一些操作要點、難點、涉及實驗成功與實驗室安全的關鍵之處，增加照片或示意圖直觀教學，并配有“特別提示”。
（2）強化了分子生物學相關技術在各實驗內容中的滲透。在第1版教材中分子生物學相關技術方法涉及較少，而在新版教材中我們將分子生物學相關技術滲透到幾個綜合性設計實驗中（如細菌、放線茵、真菌、病毒的分離培養鑒定實驗），而不是像目前多數實驗教材那樣簡單地羅列某些分子生物學技術的操作流程，從而進一步增加了教材的系統性和可操作性。
（3）注重實驗內容編寫的系統性和綜合性，加強學生科研素質的培養。本實驗教程編寫的12個實驗組中有11個為綜合性實驗，每一個實驗都將涉及某一方面或一個共同主題的有關實驗有機地組織在一起，以利于學生在更高層面上、通過實驗對某些理論知識進行全面深入地了解。本教材還特別編寫了3個有關細菌鑒定的系統性綜合實驗（實驗六、十一、十二），從編寫實驗計劃、實驗材料準備直至撰寫實驗報告，全過程指導學生完全獨立地完成有關細菌鑒定實驗（包括常規生化鑒定，血清學鑒定及分子生物學鑒定），鍛煉學生獨立操作和解決實際問題的能力，使其對科研過程有初步了解。
（4）補充更新了一些與免疫學、病毒學、細菌學等有關的應用性較強的實驗內容及技術，如增加了膠體金免疫層析診斷技術，細胞因子（白細胞介素-2、轉化生長因子β）相關實驗，RT-PCR法檢測HCV-RNA，環境、食品與藥品微生物的檢驗技術，細菌.的數值分類法及自動化鑒定系統，細菌誘變育種與基因工程相關技術等新內容。
（5）注重與理論課學習的無縫銜接：除了在實驗內容上加強與理論課學習的互補互通外，還在實驗教材附錄中增加了關于微生物學與免疫學這門課程的復習提綱及習題，便于學生對理論課的復習，從而使得這本教材除了作為實驗教材這個功能之外，還可以作為理論課的復習資料使用。
在本實驗教程編寫過程中，還參考了多本兄弟院校的實驗教材及其他文獻和著作，努力使本教材成為更有助于學生學習掌握理論知識和實驗基本技能的輔助教材。但由于編寫時間倉促，學術水平和編寫能力有限，不足之處在所難免，懇請各位同道及讀者不吝提出寶貴意見。
鄧祖軍
2016年11月
實驗室守則 1
第一篇 免疫學實驗
實驗一 常規免疫學診斷技術 3
一、凝集試驗 3
二、瓊脂擴散試驗 5
三、瓊脂凝膠免疫電泳 9
四、免疫標記技術 12
五、補體結合試驗（半量法） 16
六、非特異性免疫診斷技術 18
實驗二 非特異性免疫防御功能 26
一、血-腦屏障作用 26
二、吞噬功能 27
三、溶菌酶溶菌試驗 28
四、血清總補體活性測定 29
五、補體溶菌實驗 30
實驗三 特異性免疫防御功能 32
一、免疫血清（多克隆抗體）的制備 32
二、血清特異性抗體效價測定 34
三、細菌毒素中和實驗 36
四、分離外周血單個核細胞 37
五、E花環形成試驗（微量法） 38
六、T淋巴細胞轉化試驗 40
七、B細胞溶血空斑試驗 41
八、白細胞介素-2對CTLL-2細胞增殖的促進作用及生物活性單位測定 42
九、轉化生長因子β對T細胞增殖的抑制作用 44
實驗四 超敏反應 46
一、動物Ⅰ型超敏反應 46
二、新生兒溶血病診斷試驗 47
三、循環免疫復合物檢測——PEG比濁法 48
四、自身抗體類風濕因子的檢測 49
五、結核菌素試驗 49
第二篇 微生物學基本技能實驗
實驗五 需氧性細菌基礎實驗方法與技術 51
一、微生物實驗室安全與無菌操作技術 51
二、細菌培養基制備 53
三、需氧細菌培養法 55
四、細菌生長實驗 61
五、細菌形態與結構觀察技術 63
六、細菌代謝實驗及生化鑒定技術 73
七、細菌遺傳性狀檢測技術 85
八、藥物體外抗菌實驗技術 88
九、細菌致病性研究實驗技術 94
十、消毒與滅菌技術 101
十一、細菌菌種的保藏技術 105
實驗六 厭氧性細菌人工培養及基本性狀觀察 113
一、厭氧性細菌的培養 114
二、生物學性狀鑒定 116
三、致病性試驗 117
實驗七 真菌培養、形態觀察及鑒定方法 118
一、真菌培養方法 118
二、真菌形態學鑒定方法 119
三、基于rDNA-ITS序列分析的真菌分子鑒定方法 121
四、真菌致病性 123
實驗八 病毒培養、基本性狀觀察及檢測 126
一、病毒培養法 126
二、病毒抗原的檢測 129
三、抗病毒特異性抗體的檢測 130
四、病毒核酸的檢測 134
第三篇 微生物應用與綜合設計實驗
實驗九 環境與衛生微生物檢驗技術 142
一、實驗室微生物污染狀況檢測 142
二、食品微生物檢驗技術 146
三、藥品微生物檢驗技術 149
實驗十 細菌誘變育種與基因工程相關技術 162
一、誘變育種與篩選 162
二、噬菌體效價測定及轉導實驗 164
三、微生物基因文庫的構建與應用 167
實驗十一 革蘭陽性球菌鑒定 172
一、配制培養基 172
二、分離培養 173
三、純培養 173
四、生物學性狀鑒定 174
五、致病性試驗 176
六、甲氧西林抗藥性金黃色葡萄球菌鑒定（碘淀粉平板法） 178
七、撰寫鑒定報告 179
實驗十二 腸桿菌科細菌鑒定 180
一、配制培養基 180
二、分離培養 182
三、純培養 182
四、生物學性狀鑒定 183
五、內毒素毒性試驗 186
六、藥物敏感試驗 187
七、病后免疫力檢查——肥達試驗 187
八、撰寫鑒定報告 189
主要參考文獻 191
附錄 192
附錄一 微生物學與免疫學復習提要及習題 192
附錄二 微生物學與免疫學復習習題參考答案 216
彩插
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