分子生物學(xué)的飛速發(fā)展已滲透到醫(yī)學(xué)研究和應(yīng)用的各個領(lǐng)域，并派生出了一門全新的學(xué)科——分子醫(yī)學(xué)。分子醫(yī)學(xué)的出現(xiàn)猶如分子生物學(xué)對于生命科學(xué)之偉大意義，將全面更新傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)的模式，并開拓出醫(yī)學(xué)發(fā)展的新潮流。所以，無論是正處于醫(yī)科學(xué)習(xí)階段的青年學(xué)生，還是已翱翔在醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的廣大醫(yī)學(xué)工作者，對這一新型學(xué)科的領(lǐng)略或貫通已是勢在必行。
順應(yīng)這一新的形勢，中山大學(xué)北校區(qū)在學(xué)校專項基金的投入下，建立了設(shè)備先進(jìn)、設(shè)施完善的“分子醫(yī)學(xué)教學(xué)實驗室”，并對基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)教育中一部分沿襲多年的實驗課程進(jìn)行全新的綜合和改進(jìn)，創(chuàng)建了一門集分子生物學(xué)基本技能和醫(yī)學(xué)應(yīng)用于一體的全新的系統(tǒng)化實驗課程——分子醫(yī)學(xué)技能。本教材便是配合該新課程而編寫的。
分子醫(yī)學(xué)的主體內(nèi)容是分子生物學(xué)在醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用，既涵蓋了其主要的理論和技術(shù)體系，又側(cè)重于醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中的應(yīng)用，其中的技術(shù)體系是開展該領(lǐng)域研究的核心內(nèi)容。因其涉及面極其廣泛又錯綜復(fù)雜，眾多的技術(shù)原理和細(xì)節(jié)常常會令學(xué)子們迷惘而難以融會貫通。本書集編者多年從事醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)教學(xué)和科研之經(jīng)驗與教訓(xùn)，力求以全面系統(tǒng)的框架、簡明扼要的文字、形象易懂的圖表，把分子醫(yī)學(xué)的基本輪廓和主要技術(shù)系統(tǒng)疏理成冊，奉獻(xiàn)于窳。全書共分七篇，以分子醫(yī)學(xué)概論為引導(dǎo)；第一篇為核酸技術(shù)；第二篇為蛋白質(zhì)技術(shù)；第三篇和第四篇為免疫分析技術(shù)和細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)，是本書的主體內(nèi)容，包括了分子生物學(xué)和分子免疫學(xué)中最實用的技術(shù)原理和操作細(xì)節(jié)，敘述詳盡，對從事相關(guān)實驗操作極有幫助；第五篇概述了近年出現(xiàn)的分子醫(yī)學(xué)前沿技術(shù)；第六篇簡要介紹了分子醫(yī)學(xué)技術(shù)在醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用；第七篇為分子醫(yī)學(xué)技術(shù)數(shù)據(jù)庫。
分子生物學(xué)的誕生被認(rèn)為是第三次技術(shù)革命的標(biāo)志之一，而分子醫(yī)學(xué)又將生物醫(yī)學(xué)推向了一個嶄新階段。愿本書能對大家在最短的時間內(nèi)系統(tǒng)地掌握分子醫(yī)學(xué)這門前沿學(xué)科的基本理論和技能有所幫助，在不斷發(fā)展的醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中具備更大的適應(yīng)力和競爭力。
“分子醫(yī)學(xué)技能”課程的創(chuàng)建和本教材的編寫都是在中山大學(xué)各級管理部門的大力支持下完成的，尤其是實驗室與設(shè)備管理處林明河處長、基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院主管教學(xué)的吳忠道副院長；汪華僑教授一直以來關(guān)注并親自指導(dǎo)這一工作的進(jìn)行，付出了大量心血；實驗教學(xué)中心潘實清主任、顏少平副主任、教學(xué)科朱敬歡科長、前期工作的林達(dá)老師和曹開源老師等，都為此付出了艱辛勞動；本實驗室的駱曉楓、黃小榮、謝金衛(wèi)等技師為本書的文字編輯和校對等做了大量工作。愿我們的沒有白費，愿這一新型課程的開展和新編教材的出版能為廣大學(xué)子的學(xué)習(xí)和工作提供有益的幫助，那將是我們所能得到的最有價值的報答！
前言
本書內(nèi)容說明
分子醫(yī)學(xué)概論
1 疾病的分子機制
2 疾病的基因診斷
3 疾病的基因治療
4 疾病的基因預(yù)防
5 分子醫(yī)學(xué)技術(shù)
6 分子醫(yī)學(xué)的社會、倫理問題
7 分子醫(yī)學(xué)在現(xiàn)代醫(yī)學(xué)發(fā)展中的意義
7．1 分子醫(yī)學(xué)使臨床思維方式不斷更新
7．2 分子醫(yī)學(xué)促進(jìn)實驗醫(yī)學(xué)和經(jīng)驗醫(yī)學(xué)的融合
7．3 分子醫(yī)學(xué)加快了醫(yī)學(xué)教育的改革
主要參考文獻(xiàn)
第一篇 核酸技術(shù)
第1章 核酸制備與擴增
1．1 基因組DNA的提取與純化
1．1．1 原理
1．1．2 材料
1．1．3 實驗方案
1．1．4 常見問題及可能原因
1．2 RNA的提取和cDNA合成
1．2．1 原理
1．2．2 實驗方案
1．2．3 注意事項
1．3 聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）
1．3．1 PCR技術(shù)原理
1．3．2 材料
1．3．3 方案
1．3．4 注意事項
第2章 核酸的檢測
2．1 電泳分析法
2．1．1 原理
2．1．2 材料
2．1．3 DNA的瓊脂糖凝膠電泳的實驗方案
2．1．4 注意事項
2．1．5 結(jié)果討論
2．2 分光光度分析法
2．2．1 原理
2．2．2 紫外光譜分析法檢測DNA含量
2．2．3 分光光度法檢測RNA濃度
第3章 核酸雜交與核酸探針
3．1 概論
3．1．1 探針的種類
3．1．2 標(biāo)記物的選擇
3．1．3 核酸探針標(biāo)記的方法
3．1．4 幾種常見的雜交方法
3．2 核酸探針與雜交常規(guī)實驗
3．2．1 核酸探針的制備和標(biāo)記
3．2．2 原位雜交法進(jìn)行重組質(zhì)粒的篩選
3．2．3 Southern雜交
3．2．4 Northern雜交
第4章 基因克隆
4．1 分離目的基因和基因載體
4．1．1 概論
4．1．2 目的基因的獲取
4．1．3 質(zhì)粒制備的常規(guī)方案
4．2 限制性內(nèi)切核酸酶切割目的基因和基因載體
4．2．1 概論
4．2．2 限制性內(nèi)切核酸酶的酶切與鑒定
4．3 目的基因和基因載體的體外連接
4．3．1 概論
4．3．2 載體與目的基因的連接
4．4 重組DNA轉(zhuǎn)化宿主細(xì)胞
4．4．1 概論
4．4．2 重組DNA轉(zhuǎn)化大腸桿菌
4．5 重組體陽性克隆的篩選
4．5．1 概論
4．5．2 實驗方案
4．6 外源基因在宿主細(xì)胞中的表達(dá)
4．6．1 概論
4．6．2 在大腸桿菌中表達(dá)蛋白產(chǎn)物
主要參考文獻(xiàn)
第二篇 蛋白質(zhì)技術(shù)
第5章 蛋白質(zhì)樣品的制備技術(shù)
5．1 蛋白質(zhì)樣品的預(yù)處理
5．2 細(xì)胞的破碎
5．2．1 機械方法
5．2．2 物理方法
5．2．3 化學(xué)及生物化學(xué)方法
5．3 蛋白質(zhì)的提取
5．3．1 水溶液提取法
5．3．2 有機溶劑提取法
5．3．3 表面活性劑的利用
5．3．4 提取過程中的蛋白質(zhì)保護
5．4 蛋白質(zhì)的分離純化
5．4．1 根據(jù)蛋白質(zhì)溶解度不同的分離方法
5．4．2 根據(jù)蛋白質(zhì)分子質(zhì)量大小不同的分離方法
5．4．3 根據(jù)蛋白質(zhì)帶電性質(zhì)進(jìn)行分離
5．4．4 根據(jù)配體特異性的分離方法——親和層析法
5．5 蛋白質(zhì)濃縮、干燥和保存
5．5．1 蛋白質(zhì)的濃縮
5．5．2 蛋白質(zhì)的干燥
5．5．3 蛋白質(zhì)的儲存
第6章 蛋白質(zhì)定量檢測技術(shù)
6．1 紫外（UV）吸收測定法
6．1．1 實驗原理
6．1．2 試劑和設(shè)備
6．1．3 操作方法
6．1．4 注意事項
6．2 Folin-酚試劑法（Lowry法）
6．2．1 基本原理
6．2．2 試劑和設(shè)備
6．2．3 操作步驟
62．4 注意事項
6．3 考馬斯亮藍(lán)法（Bradford檢測法）
6．3．1 基本原理
6．3．2 試劑與設(shè)備
6．3．3 操作步驟
6．3．4 注意事項
6．4 二喹啉甲酸（BCA）檢測法
6．4．1 基本原理
6．4．2 試劑與設(shè)備
64．3 操作步驟
64．4 注意事項
第7章 蛋白質(zhì)SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳
7．1 聚丙烯酰胺凝膠的合成和結(jié)構(gòu)
7．2 聚丙烯酰胺凝膠濃度和孔徑的選擇
7．3 不連續(xù)聚丙烯酰胺凝膠電泳的基本原理
7．4 實驗材料和試劑
7．5 實驗步驟
7．5．1 SDS-聚丙烯酰胺凝膠的灌制
7．6 膠的染色及處理
7．6．1 用考馬斯亮藍(lán)對SDS-聚丙烯酰胺凝膠進(jìn)行染色
7．6．2 用銀鹽對SDS-聚丙烯酰胺凝膠進(jìn)行染色
7．6．3 SDS-聚丙烯酰胺凝膠的干燥
7．7 注意事項
附：圓盤電泳
材料
操作
第8章 蛋白質(zhì)的免疫印跡技術(shù)
8．1 蛋白質(zhì)的SDS-聚丙烯酰胺電泳
8．2 蛋白質(zhì)從凝膠轉(zhuǎn)移至膜上
8．2．1 基本原理
8．2．2 試劑與器材
8．2．3 操作步驟
8．2．4 注意事項
8．3 蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移膜的免疫檢測
＆3．1 基本原理
8．3．2 試劑
8．3．3 操作步驟
8．4 免疫印跡后膜的重復(fù)使用
8．4．1 消除緩沖液（100ml）
8．4．2 操作步驟
8．5 免疫印跡中需要注意的問題
8．5．1 抗體的性質(zhì)與使用
8．5．2 樣品中待檢測蛋白質(zhì)的含量
8．5．3 背景問題
8．5．4 轉(zhuǎn)印效率低
8．5．5 設(shè)置對照與解釋結(jié)果
8．5．6 免疫印跡技術(shù)的靈敏度
第9章 蛋白質(zhì)層析技術(shù)
9．1 層析的基本概念
9．2 層析的基本理論
9．3 層析法的分類
9．4 柱層析的基本裝置及基本操作
9．4．1 柱層析的基本裝置
9．4．2 柱層析的基本操作
9．5 幾種常見的蛋白質(zhì)層析技術(shù)
9．5．1 凝膠層析
9．5．2 離子交換層析
9．5．3 親和層析
9．5．4 高效液相色譜法
附：實驗
實驗一 血清-球蛋白的分離純化（分子篩層析法）
實驗二 血清蛋白質(zhì)的分離（離子交換層析法）
實驗三 凝膠層析法分離蛋白質(zhì)
主要參考文獻(xiàn)
……
第三篇 免疫分析技術(shù)
第四篇 細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)
第五篇 分子醫(yī)學(xué)前沿技術(shù)
第六篇 分子醫(yī)學(xué)技術(shù)在醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用
第七篇 分子醫(yī)學(xué)技術(shù)數(shù)據(jù)庫
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