本書(shū)主要圍繞學(xué)生能力、素質(zhì)的培養(yǎng)和提高，重視檢驗(yàn)質(zhì)量、醫(yī)療服務(wù)、生物安全意識(shí)和臨床思維能力的全面培養(yǎng)進(jìn)行編寫(xiě)。本書(shū)的實(shí)驗(yàn)教學(xué)內(nèi)容分為三個(gè)層次：驗(yàn)證性實(shí)驗(yàn)、綜合性實(shí)驗(yàn)、研究應(yīng)用性實(shí)驗(yàn)。其中，驗(yàn)證性實(shí)驗(yàn)詳細(xì)撰寫(xiě)了臨床檢驗(yàn)的基本技術(shù)和臨床基礎(chǔ)檢驗(yàn)學(xué)的經(jīng)典試驗(yàn)，按實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹⒃怼⑵鞑摹⒉襟E、注意事項(xiàng)、方法學(xué)評(píng)價(jià)、思考題進(jìn)行編寫(xiě)，體現(xiàn)了基礎(chǔ)理論、基本知識(shí)、基本技能；綜合性實(shí)驗(yàn)是根據(jù)臨床檢驗(yàn)的實(shí)際運(yùn)用情況，按實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)思路與目的、實(shí)驗(yàn)原理、器材、步驟、結(jié)果、結(jié)果分析、討論提綱進(jìn)行編寫(xiě)，用以提高學(xué)生對(duì)實(shí)驗(yàn)的質(zhì)量控制、結(jié)果分析、完整實(shí)驗(yàn)報(bào)告等方面的綜合運(yùn)用能力；研究應(yīng)用性實(shí)驗(yàn)是從檢驗(yàn)與臨床相結(jié)合的角度出發(fā)設(shè)計(jì)，并按總的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)思路與目的、實(shí)驗(yàn)步驟、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)提示、實(shí)驗(yàn)報(bào)告要求及每個(gè)實(shí)驗(yàn)的研究目的、研究背景、臨床資料、實(shí)驗(yàn)器材、實(shí)驗(yàn)檢查項(xiàng)目、實(shí)驗(yàn)步驟、討論提綱進(jìn)行編寫(xiě)；用以培養(yǎng)學(xué)生科研設(shè)計(jì)能力、實(shí)驗(yàn)技能、綜合實(shí)驗(yàn)?zāi)芰Α⑴c臨床結(jié)合運(yùn)用和分析的能力，為今后的臨床工作打下理論和實(shí)踐的基礎(chǔ)。
《全國(guó)高等院校醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)規(guī)劃教材:臨床基礎(chǔ)檢驗(yàn)學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)》可供高等院校醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)專(zhuān)業(yè)、衛(wèi)生檢驗(yàn)專(zhuān)業(yè)學(xué)生實(shí)驗(yàn)使用，也可供從事臨床檢驗(yàn)工作和醫(yī)學(xué)研究的技術(shù)人員參考使用，并可用作臨床醫(yī)學(xué)、醫(yī)學(xué)影像學(xué)、麻醉學(xué)、法醫(yī)學(xué)、預(yù)防醫(yī)學(xué)以及藥學(xué)專(zhuān)業(yè)實(shí)驗(yàn)教學(xué)的參考用書(shū)。
序
前言
第一篇 臨床基礎(chǔ)檢驗(yàn)學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)及驗(yàn)證性實(shí)驗(yàn)
第一章 臨床檢驗(yàn)基本技術(shù)
實(shí)驗(yàn)一 光學(xué)顯微鏡的使用
實(shí)驗(yàn)二 微量吸管的使用
實(shí)驗(yàn)三 改良Neubauer計(jì)數(shù)盤(pán)的使用
實(shí)驗(yàn)四 血涂片制備與染色
實(shí)驗(yàn)五 血液標(biāo)本采集
第二章 血液一般檢驗(yàn)
實(shí)驗(yàn)一 白細(xì)胞計(jì)數(shù)
實(shí)驗(yàn)二 白細(xì)胞分類(lèi)計(jì)數(shù)
實(shí)驗(yàn)三 外周血白細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢查
實(shí)驗(yàn)四 嗜酸粒細(xì)胞計(jì)數(shù)
實(shí)驗(yàn)五 血小板計(jì)數(shù)
實(shí)驗(yàn)六 紅細(xì)胞計(jì)數(shù)
實(shí)驗(yàn)七 血紅蛋白測(cè)定（氰化高鐵血紅蛋白測(cè)定法）
實(shí)驗(yàn)八 紅細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢查
實(shí)驗(yàn)九 紅細(xì)胞比容測(cè)定
實(shí)驗(yàn)十 網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)
實(shí)驗(yàn)十一 紅細(xì)胞沉降率測(cè)定
實(shí)驗(yàn)十二 血細(xì)胞分析儀的使用
第三章 尿液檢驗(yàn)
實(shí)驗(yàn)一 尿液一般檢查
實(shí)驗(yàn)二 尿滲透量測(cè)定
實(shí)驗(yàn)三 尿液蛋白質(zhì)定性實(shí)驗(yàn)
實(shí)驗(yàn)四 尿液葡萄糖班氏定性實(shí)驗(yàn)
實(shí)驗(yàn)五 尿液酮體定性測(cè)定
實(shí)驗(yàn)六 尿液膽紅素定性測(cè)定（Harrrison法）
實(shí)驗(yàn)七 尿膽原定性測(cè)定（改良Ehrlich法）
實(shí)驗(yàn)八 尿液本周蛋白定性檢查
實(shí)驗(yàn)九 乳糜尿定性檢查
實(shí)驗(yàn)十 尿液人絨毛膜促性腺激素定性檢查
實(shí)驗(yàn)十一 尿液的有形成分檢查
實(shí)驗(yàn)十二 尿液有形成分的定量計(jì)數(shù)
實(shí)驗(yàn)十三 尿液自動(dòng)化分析儀檢驗(yàn)
第四章 糞便檢驗(yàn)
實(shí)驗(yàn)一 糞便常規(guī)檢查
實(shí)驗(yàn)二 糞便分析工作站
實(shí)驗(yàn)三 糞便隱血試驗(yàn)
第五章 生殖系統(tǒng)分泌物檢查
實(shí)驗(yàn)一 精液檢驗(yàn)
實(shí)驗(yàn)二 前列腺液檢查
實(shí)驗(yàn)三 陰道分泌物檢驗(yàn)
第六章 其他體液
實(shí)驗(yàn)一 腦脊液常規(guī)檢驗(yàn)
實(shí)驗(yàn)二 漿膜腔積液常規(guī)檢驗(yàn)
實(shí)驗(yàn)三 關(guān)節(jié)腔積液檢驗(yàn)
實(shí)驗(yàn)四 痰液檢查
實(shí)驗(yàn)五 胃液與十二指腸引流液檢驗(yàn)
實(shí)驗(yàn)六 羊水檢查
第二篇 臨床基礎(chǔ)檢驗(yàn)學(xué)綜合性實(shí)驗(yàn)及研究應(yīng)用性實(shí)驗(yàn)
第七章 臨床檢驗(yàn)技能綜合訓(xùn)練
實(shí)驗(yàn)一 血常規(guī)檢查與臨床檢驗(yàn)基本技術(shù)綜合性實(shí)驗(yàn)
實(shí)驗(yàn)二 紅細(xì)胞平均指數(shù)測(cè)定與臨床檢驗(yàn)基本技術(shù)綜合性實(shí)驗(yàn)
實(shí)驗(yàn)三 尿液常規(guī)檢驗(yàn)與臨床檢驗(yàn)基本技術(shù)綜合性實(shí)驗(yàn)
實(shí)驗(yàn)四 血細(xì)胞分析儀的校準(zhǔn)
實(shí)驗(yàn)五 血細(xì)胞分析儀的性能評(píng)價(jià)
實(shí)驗(yàn)六 血細(xì)胞分析儀檢測(cè)結(jié)果的比對(duì)
實(shí)驗(yàn)七 臨床血液常規(guī)檢驗(yàn)室內(nèi)質(zhì)控
實(shí)驗(yàn)八 臨床血液常規(guī)檢驗(yàn)室問(wèn)質(zhì)量評(píng)價(jià)
第八章 綜合性、設(shè)計(jì)性、應(yīng)用性的“三性”跨學(xué)科實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)
實(shí)驗(yàn)一 傳染性單核細(xì)胞增多癥的實(shí)驗(yàn)室診斷
實(shí)驗(yàn)二 系統(tǒng)性紅斑狼瘡腎損害的實(shí)驗(yàn)室診斷
參考文獻(xiàn)
附 錄
附錄一 臨床檢驗(yàn)項(xiàng)目SoP編寫(xiě)要求
附錄二 醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室醫(yī)療廢物處理及要求
彩圖
第一篇 臨床基礎(chǔ)檢驗(yàn)學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)及驗(yàn)證性實(shí)驗(yàn)
第一章 臨床檢驗(yàn)基本技術(shù)
實(shí)驗(yàn)一 光學(xué)顯微鏡的使用
【實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹?/span>
1.掌握光學(xué)顯微鏡的正確使用和維護(hù)方法。
2.熟悉光學(xué)顯微鏡的結(jié)構(gòu)和原理。
【實(shí)驗(yàn)原理】
光學(xué)顯微鏡是由物鏡和目鏡兩組會(huì)聚透鏡組成的光學(xué)折射成像系統(tǒng)。置于物鏡前方的被觀(guān)察物被作第一級(jí)放大成一倒立實(shí)像，該實(shí)像再被目鏡作第二級(jí)放大成一虛像，位于人眼的明視野處。
【實(shí)驗(yàn)器材】
1.器材 光學(xué)顯微鏡、擦鏡紙。
2.試劑 香柏油、清潔液（乙醚與無(wú)水乙醇3∶7）。
3.標(biāo)本 瑞氏染色血涂片。
【實(shí)驗(yàn)步驟】
1.實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備
（1）右手握鏡臂，左手托鏡座，平貼胸前，將顯微鏡從鏡箱內(nèi)取出后置于平穩(wěn)的實(shí)驗(yàn)臺(tái)上，熟悉顯微鏡的結(jié)構(gòu)。
（2）打開(kāi)電源開(kāi)關(guān)，旋轉(zhuǎn)粗準(zhǔn)焦螺旋，將載物臺(tái)降至最低，旋轉(zhuǎn)光調(diào)節(jié)旋鈕，調(diào)整聚光器高度和光柵大小，使光強(qiáng)度適中。
（3）將瑞氏染色血涂片置于載物臺(tái)上并正對(duì)通光孔的中心。
2.低倍鏡觀(guān)察
（1）轉(zhuǎn)動(dòng)轉(zhuǎn)換器，使低倍鏡（10目鏡×10物鏡）對(duì)準(zhǔn)樣本上方。從側(cè)面觀(guān)察，調(diào)節(jié)粗準(zhǔn)焦螺旋將物鏡降至距標(biāo)本約0.5cm處。
（2）通過(guò)目鏡觀(guān)察標(biāo)本，慢慢旋轉(zhuǎn)粗準(zhǔn)焦螺旋使載物臺(tái)向下至出現(xiàn)物像后調(diào)節(jié)細(xì)準(zhǔn)焦螺旋至成像清晰。
3.高倍鏡觀(guān)察 將物鏡轉(zhuǎn)換為高倍鏡（10目鏡×40物鏡），調(diào)節(jié)細(xì)準(zhǔn)焦螺旋即可看到清晰物像，一般不需要調(diào)節(jié)粗準(zhǔn)焦螺旋。
4.油鏡觀(guān)察 將聚光器升至與載物臺(tái)平齊，光柵開(kāi)至最大，使射入的光線(xiàn)最強(qiáng)。在血涂片的體尾交界處滴上香柏油一滴，轉(zhuǎn)換物鏡為油鏡（10目鏡×100物鏡），調(diào)節(jié)細(xì)準(zhǔn)焦螺旋至可看到清晰物像。
5.收鏡
（1）觀(guān)察完畢后，取下血涂片，關(guān)閉顯微鏡電源，用滴上清潔液的擦鏡紙將鏡頭擦拭干凈并用綢布擦拭鏡身。
（2）將物鏡轉(zhuǎn)換成“八”字形，載物臺(tái)、聚光器下降至最低處，輕輕放回顯微鏡箱內(nèi)。
【注意事項(xiàng)】
1.搬動(dòng)顯微鏡時(shí)，勿用一只手提，前后搖擺，使目鏡滑出跌落。
2.一定要使用轉(zhuǎn)換器切換鏡頭，以免使光軸發(fā)生彎曲。轉(zhuǎn)動(dòng)粗、細(xì)準(zhǔn)焦螺旋時(shí)，不要用力過(guò)猛，以防止損壞機(jī)件。
3.嚴(yán)禁隨意取出目鏡，以免灰塵掉入鏡筒。嚴(yán)禁拆下顯微鏡的其他部件導(dǎo)致部件失落或損壞。
4.注意不要短時(shí)頻繁開(kāi)關(guān)顯微鏡，使用間隙時(shí)要將光調(diào)節(jié)旋鈕調(diào)至最小。
5.使用油鏡時(shí)，切記只能將鏡頭上移，不可下移，以免壓碎物品，碰壞鏡頭。
6.擦拭目鏡、物鏡的污物應(yīng)用專(zhuān)用的擦鏡紙和清潔液。切勿用手指、紗布和普通紙擦。
7.觀(guān)察時(shí)坐姿端正，腰背挺直，雙眼睜開(kāi)。雙筒顯微鏡注意調(diào)節(jié)光瞳間距，使雙目觀(guān)察到一個(gè)單一像，并可旋轉(zhuǎn)左目鏡上的屈光度調(diào)節(jié)環(huán)，補(bǔ)償雙眼視力差。
8.低倍鏡主要用于全片觀(guān)察、細(xì)胞計(jì)數(shù)、對(duì)尿液中管型以及糞便中寄生蟲(chóng)的觀(guān)察等，因此要注意利用光柵調(diào)節(jié)視野光線(xiàn)強(qiáng)弱，以便觀(guān)察到相應(yīng)目標(biāo)物體；油鏡主要用于細(xì)胞的分類(lèi)和形態(tài)觀(guān)察，因此應(yīng)把
光柵充分開(kāi)大，保證射入的光線(xiàn)最強(qiáng)。
9.如視場(chǎng)中出現(xiàn)污點(diǎn)應(yīng)檢查并徹底擦凈目鏡、聚光鏡、濾色鏡。
10.顯微鏡的工作溫度范圍一般為5～40℃，存放的環(huán)境應(yīng)防震、防曬、防塵、防潮。
【方法學(xué)評(píng)價(jià)】
光學(xué)顯微鏡成本低廉，操作簡(jiǎn)便，無(wú)需特殊的實(shí)驗(yàn)條件，主要用于細(xì)胞、微生物、寄生蟲(chóng)蟲(chóng)卵等形態(tài)學(xué)方面的檢測(cè)，對(duì)形態(tài)的識(shí)別直觀(guān)準(zhǔn)確，已成為臨床檢驗(yàn)中必不可少的檢測(cè)工具。但光學(xué)顯微鏡對(duì)未
染色的細(xì)胞立體形態(tài)不如相差顯微鏡清晰，對(duì)培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞不如倒置顯微鏡易觀(guān)察，沒(méi)有熒光顯微鏡、暗視野顯微鏡的功能。
【思考題】
1.使用顯微鏡觀(guān)察物體時(shí)應(yīng)注意什么？
2.怎樣使用低倍鏡、高倍鏡和油鏡觀(guān)察物體？
（程樹(shù)強(qiáng)）
實(shí)驗(yàn)二 微量吸管的使用
【實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹?/span>
1.掌握微量吸管的正確使用方法。
2.掌握影響微量吸管吸血量準(zhǔn)確性的各種因素。
【實(shí)驗(yàn)原理】
擠壓帶孔的乳膠吸頭使微量吸管產(chǎn)生負(fù)壓而吸取液體。
【實(shí)驗(yàn)器材】
1.器材 一次性微量吸管、帶孔乳膠吸頭、試管、試管架、干棉球、2ml刻度吸管、一次性醫(yī)用乳膠手套。
2.試劑 生理鹽水。
3.標(biāo)本 健康人抗凝血。
【實(shí)驗(yàn)步驟】
1.準(zhǔn)備
（1）將微量吸管的紅色線(xiàn)插管端插入帶孔乳膠吸頭的連接處上，注意兩者間應(yīng)連接嚴(yán)密不漏氣。
（2）加稀釋液：取試管1支，加生理鹽水2ml。
2.使用微量吸管采血
（1）持管吸血：有兩種方法，可根據(jù)掌握熟悉情況自主選擇（表1唱2唱1）。
（2）拭余血：用干棉球順微量吸管口方向拭凈管外余血，并輕輕蘸拭管尖口，以蘸出超過(guò)刻度線(xiàn)2mm以?xún)?nèi)的少量余血，使其退回到刻度線(xiàn)，確保吸血量的準(zhǔn)確。
（3）釋放血液：將微量吸管插入含生理鹽水的試管底部，食指或拇指蓋住吸頭頂端或側(cè)面的小孔加壓乳膠吸頭，將微量吸管內(nèi)的血液緩慢輕輕的吹出，再用上清液反復(fù)沖洗管內(nèi)余血2～3次，并立即混勻
。
【注意事項(xiàng)】
1.吸取抗凝血標(biāo)本時(shí)，注意管尖不能離開(kāi)液面，如是末梢采血時(shí)，管尖口也不能離開(kāi)血滴，以免吸入空氣產(chǎn)生氣泡；吸血時(shí)也不要用力過(guò)猛，將血液吸入乳膠吸頭。
2.吸血量不能超過(guò)所需容量刻度線(xiàn)2mm，以免黏附管壁多余的血液影響血細(xì)胞計(jì)數(shù)結(jié)果。
3.若吸血量不到所需容量刻度線(xiàn)時(shí)，抗凝血可以吹出管內(nèi)血液后，重新吸血，但若是末梢采血?jiǎng)t不能（詳見(jiàn)實(shí)驗(yàn)五末梢采血）。
4.為了避免患者之間的交叉感染，微量吸管必須一人一管，一次性使用。
5.臨床血常規(guī)檢查較多，故一次性微量吸管的使用量大，不可能鑒定每一根微量吸管的質(zhì)量，可采取抽樣方式進(jìn)行，即從每一批購(gòu)進(jìn)的一次性微量吸管中，按隨機(jī)抽樣原則至少抽取50支，用認(rèn)可方法如
水銀稱(chēng)重法、純水稱(chēng)重法、比色法等對(duì)其進(jìn)行鑒定，凡微量吸管誤差≤允許誤差±1%者為合格，否則為不合格。所抽樣品中至少90%以上是合格品，其余不合格者的誤差均在±1%～±2%，且所抽樣品CV≤
1%，可認(rèn)為這批微量吸管合格，能用于臨床。如不能滿(mǎn)足要求，建議可更換吸管批號(hào)再鑒定，若還不行，最好更換廠(chǎng)家，并做好鑒定記錄，以確保微量吸管的質(zhì)量。
6.使用廢棄的微量吸管屬于銳利物類(lèi)醫(yī)用廢物，必須放于專(zhuān)用的一次性利器廢物盒內(nèi)，24小時(shí)內(nèi)由指定的醫(yī)療廢物處理單位回收，48小時(shí)內(nèi)徹底安全焚燒。
【方法學(xué)評(píng)價(jià)】
一次性微量吸管由于采用一人一管，一次性使用，可有效地避免原血紅蛋白微量吸管重復(fù)使用采血而可能引起患者之間的交叉感染。
【思考題】
1.哪些因素可影響一次性微量吸管取血量準(zhǔn)確性和精密度？
2.怎樣控制微量吸管采血的質(zhì)量？
（夏曙華）
實(shí)驗(yàn)三 改良Neubauer計(jì)數(shù)盤(pán)的使用
【實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹?/span>
1.掌握改良Neubauer計(jì)數(shù)盤(pán)的結(jié)構(gòu)、注意事項(xiàng)和正確使用的方法。
2.了解改良Neubauer計(jì)數(shù)盤(pán)的校正。
【實(shí)驗(yàn)原理】
將一定倍數(shù)稀釋的血液或體液混勻后，滴入具有精密劃分刻度和相應(yīng)固定體積的血細(xì)胞計(jì)數(shù)盤(pán)中，根據(jù)標(biāo)本和計(jì)數(shù)的細(xì)胞不同，在顯微鏡下選擇相應(yīng)的方格計(jì)數(shù)一定容積內(nèi)的細(xì)胞數(shù)，乘以稀釋倍數(shù)，即
可換算成單位體積內(nèi)的某種細(xì)胞數(shù)。
【實(shí)驗(yàn)器材】
1.器材 改良牛鮑（Neubauer）計(jì)數(shù)盤(pán)及蓋玻片、普通光學(xué)顯微鏡、綢布、微量吸管、1ml和2ml刻度吸管、大試管（15mm×100mm）、小試管（10mm×100mm）及試管架、記號(hào)筆。
改良牛鮑計(jì)數(shù)盤(pán)為優(yōu)質(zhì)厚玻璃制成，每塊計(jì)數(shù)盤(pán)由“H”型凹槽分為兩個(gè)相同的計(jì)數(shù)池，計(jì)數(shù)池兩側(cè)各有一條支持柱，比計(jì)數(shù)池平面高0.10mm。將特制的專(zhuān)用蓋玻片覆蓋其上，蓋玻片與計(jì)數(shù)池間形成
0.1mm的縫隙（圖1唱3唱1）。計(jì)數(shù)池為長(zhǎng)、寬各3.00mm的方格，被平分為9個(gè)大方格，每個(gè)大方格的邊長(zhǎng)為1.0mm，面積為1.0mm×1.0mm＝1.0mm2，容積為1.0mm2×0.1mm＝0.1mm3（相當(dāng)于0.1μl）。中央
大方格用雙線(xiàn)分成25個(gè)中方格，每個(gè)中方格又用單線(xiàn)分為16個(gè)小方格，共400個(gè)小方格，其中位于正中及四角的5個(gè)中方格為紅細(xì)胞和血小板計(jì)數(shù)區(qū)。四角的4個(gè)大方格用單線(xiàn)劃分為16個(gè)中方格，作白細(xì)胞
計(jì)數(shù)用（圖1唱3唱2）。
2.試劑 紅細(xì)胞稀釋液、白細(xì)胞稀釋液。
3.標(biāo)本 EDTA鹽抗凝血。
【實(shí)驗(yàn)步驟】
1.計(jì)數(shù)盤(pán)的準(zhǔn)備 用綢布拭凈血細(xì)胞計(jì)數(shù)盤(pán)和蓋玻片，采用“推式蓋片法”即從計(jì)數(shù)盤(pán)一側(cè)的計(jì)數(shù)池下緣向另一側(cè)計(jì)數(shù)池方向平推血蓋片，將其蓋于計(jì)數(shù)池上備用。
2.稀釋血液 取大小試管各1支，大試管標(biāo)注RBC，加紅細(xì)胞稀釋液2ml、抗凝血10μl，小試管標(biāo)注WBC，加白細(xì)胞稀釋液0.38ml、抗凝血20μl，均立即混勻備用。取抗凝血稀釋的操作按照本章實(shí)驗(yàn)二步
驟進(jìn)行。
3.充池 充分混勻RBC懸液，用微量吸管吸取其細(xì)胞懸液，沿計(jì)數(shù)盤(pán)和蓋玻片交界的狹縫處緩慢滴入，由于虹吸作用使液體順其間隙充滿(mǎn)計(jì)數(shù)池；以同樣方法再取WBC懸液在另一側(cè)計(jì)數(shù)盤(pán)充池，將計(jì)數(shù)盤(pán)
平置于桌面上靜置2～3min，待細(xì)胞下沉。
4.顯微鏡細(xì)胞計(jì)數(shù)
（1）將計(jì)數(shù)盤(pán)置于顯微鏡鏡臺(tái)上，調(diào)低聚光器，調(diào)節(jié)顯微鏡光柵大小，用低倍鏡觀(guān)察計(jì)數(shù)盤(pán)的整個(gè)結(jié)構(gòu)（大、中、小方格）及特征，同時(shí)觀(guān)察血細(xì)胞是否均勻分布，嚴(yán)重分布不均時(shí)應(yīng)重新充池。
（2）在低倍鏡下選擇計(jì)數(shù)池四角的4個(gè)大方格計(jì)數(shù)白細(xì)胞，在高倍鏡下選擇計(jì)數(shù)池中央大方格位于正中及四角的5個(gè)中方格計(jì)數(shù)紅細(xì)胞。
【注意事項(xiàng)】
1.擦拭計(jì)數(shù)盤(pán)和蓋玻片應(yīng)選用清潔、干燥、柔軟的綢布為宜，切勿用粗糙織物擦拭，以免磨損計(jì)數(shù)盤(pán)上的刻度。擦拭后手指不能接觸其玻璃表面，以防污染油膩導(dǎo)致充液時(shí)產(chǎn)生氣泡。
2.加蓋玻片的方式不同可影響充液高度，WHO推薦采用“推式”加蓋玻片法。
3.充液前應(yīng)適當(dāng)用力旋轉(zhuǎn)試管使稀釋血液中血細(xì)胞充分混勻，且需避免搖出過(guò)多氣泡，使血細(xì)胞黏在管壁上，影響計(jì)數(shù)結(jié)果。
4.計(jì)數(shù)盤(pán)需平放，充池須一次完成，充液量以液體恰好充滿(mǎn)計(jì)數(shù)池為宜，如充液量過(guò)少計(jì)數(shù)池的單位體積內(nèi)細(xì)胞懸液量不足，過(guò)多使懸液外溢，斷續(xù)充液易產(chǎn)生氣泡或充液后蓋片移動(dòng)等，均可使細(xì)胞分
布不勻，應(yīng)拭凈計(jì)數(shù)盤(pán)及蓋玻片后重新充池。
5.充池后白細(xì)胞和紅細(xì)胞計(jì)數(shù)一般需沉淀2～3min，待細(xì)胞充分沉淀后再計(jì)數(shù)，以避免因細(xì)胞不在計(jì)數(shù)池的同一平面視野而漏計(jì)。但沉淀時(shí)間不能過(guò)長(zhǎng)，因計(jì)數(shù)池內(nèi)稀釋液揮發(fā)影響計(jì)數(shù)結(jié)果。
6.計(jì)數(shù)紅細(xì)胞用高倍鏡，計(jì)數(shù)白細(xì)胞用低倍鏡。細(xì)胞計(jì)數(shù)應(yīng)按一定順序，即呈“弓”字形的移動(dòng)視野，逐格進(jìn)行計(jì)數(shù)，對(duì)于壓線(xiàn)細(xì)胞按數(shù)上不數(shù)下，數(shù)左不數(shù)右的原則進(jìn)行（圖1唱3唱3），避免漏計(jì)或重
復(fù)計(jì)數(shù)。
7.計(jì)數(shù)細(xì)胞時(shí)，應(yīng)左手推動(dòng)顯微鏡的推動(dòng)器，右手調(diào)節(jié)顯微鏡的微調(diào)螺旋，以便識(shí)別或鑒別細(xì)胞、非細(xì)胞成分。
8.血蓋片應(yīng)為血細(xì)胞計(jì)數(shù)盤(pán)的專(zhuān)用蓋片，其規(guī)格為24.0mm×20.0mm×0.6mm，要求蓋片兩面平整光滑，平面誤差應(yīng)＜±0.002mm，高倍鏡無(wú)裂隙，有一定的重量，不被細(xì)胞懸液所抬浮。血蓋片的均勻厚度
鑒定：用微米級(jí)千分尺對(duì)其厚度進(jìn)行多點(diǎn)檢測(cè)（至少9個(gè)區(qū)，每區(qū)測(cè)2個(gè)點(diǎn)），各點(diǎn)的最大厚度差應(yīng)≤±2μm為合格。血蓋片的平整度鑒定：①用平面平晶儀檢測(cè)蓋玻片兩表面的干涉條紋，其條紋細(xì)密均
勻或微量彎曲即為合格。②拭凈待測(cè)血蓋片后，將其覆于標(biāo)準(zhǔn)血蓋片上，在適當(dāng)光線(xiàn)下有均勻完整彩虹出現(xiàn)者為合格。③將拭凈的蓋玻片反貼在光滑清潔的平面反光鏡上，立即將反光鏡水平抬起，若血
蓋片能被反光鏡吸附，且吸附時(shí)間較長(zhǎng)（越長(zhǎng)越好），最后呈圓弧形旋轉(zhuǎn)落下為合格（兩面都應(yīng)檢查）。
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