《西安交通大學本科“十二五”規劃教材:基因工程學原理(第3版)》較為全面、系統地闡述了基因工程的基本理論和基本概念,并力求反映該學科的最新進展。全書共14章,包括基因工程的基礎理論,如生物大分子、基因工程的工具酶、目的基因的獲得、基因擴增、基因的體外重組、基因的轉移與重組體的檢測、克隆基因的表達;基因工程在不同領域的應用,如酵母菌的基因工程、植物的基因工程、哺乳動物的基因工程、醫藥工業的基因工程、遺傳檢測與基因治療;以及基因工程與社會倫理道德等有關問題。
《西安交通大學本科“十二五”規劃教材:基因工程學原理(第3版)》可作為生物工程專業基因工程課程的教材,也可供相關學科各專業的教師、學生和科研工作者參考。
第1章 緒論
1.1 基因與基因工程
1.1.1 基因的概念
1.1.2 基因工程的誕生與發展
1.1.3 基因工程的研究內容
1.1.4 基因工程與生物工程的關系
1.2 基因工程的操作和應用
1.2.1 基因工程的操作流程
1.2.2 基因工程的應用
1.3 基因工程的安全性
1.3.1 基因工程的安全隱患
1.3.2 重組DNA研究的安全措施
1.3.3 轉基因產品的消費安全性
思考題
第1章 緒論
1.1 基因與基因工程
1.1.1 基因的概念
1.1.2 基因工程的誕生與發展
1.1.3 基因工程的研究內容
1.1.4 基因工程與生物工程的關系
1.2 基因工程的操作和應用
1.2.1 基因工程的操作流程
1.2.2 基因工程的應用
1.3 基因工程的安全性
1.3.1 基因工程的安全隱患
1.3.2 重組DNA研究的安全措施
1.3.3 轉基因產品的消費安全性
思考題
第2章 生物大分子——核酸與蛋白質
2.1 核酸的結構與性質
2.1.1 核苷酸
2.1.2 DNA的結構
2.1.3 RNA的結構
2.1.4 核酸的性質
2.1.5 核酸的定量和純度測定
2.2 蛋白質的結構和性質
2.2.1 蛋白質的一級結構
2.2.2 蛋白質的二級結構
2.2.3 蛋白質的三級結構
2.2.4 蛋白質的性質
2.3 基因的組織
2.3.1 原核生物基因的結構
2.3.2 真核生物基因的結構
2.4 大分子間的信息傳導
2.4.1 DNA的復制
2.4.2 遺傳信息的轉錄
2.4.3 RNA的翻譯
思考題
第3章 基因工程的工具酶
3.1 限制性核酸內切酶
3.1.1 寄主的限制和修飾現象
3.1.2 限制性核酸內切酶的類型
3.1.3 限制性核酸內切酶的命名
3.1.4 影響限制性核酸內切酶活性的因素
3.1.5 限制性核酸內切酶對DNA的消化作用
3.1.6 限制性核酸內切酶反應的終止
3.2 DNA修飾酶
3.2.1 核酸酶
3.2.2 聚合酶
3.2.3 修飾DNA分子末端的酶
3.3 DNA連接酶
3.3.1 大腸桿菌和T4噬菌體的DNA連接酶
3.3.2 影響連接反應的因素
思考題
第4章 目的基因的獲得
4.1 從基因組DNA中獲得目的基因
4.1.1 堿抽提法提取質粒DNA
4.1.2 層析法獲得細胞總RNA
4.2 從基因文庫中篩選目的基因
4.2.1 基因組文庫的構建
4.2.2 cDNA文庫的構建
4.3 化學法合成目的基因
……
第5章 基因擴增
第6章 基因的體外重組
第7章 基因的轉移與重組體的檢測
第8章 外源基因在原核細胞中的表達
第9章 酵母的基因工程
第10章 轉基因植物
第11章 哺乳動物細胞的基因工程與轉基因動物
第12章 基因工程與藥物蛋白生產
第13章 基因診斷與基因治療
第14章 基因工程與社會倫理道德
參考文獻
雖然植物是非常吸引人的研究主題,但它仍具有一些不足。對分子遺傳學家來說,不足之一是許多植物是多倍體,因而具有龐大的基因組。許多植物屬中都有多倍體種存在。三分之二的草本植物是多倍體。有的屬中的植物種的染色體數目從24個至144個。組織培養的植物細胞由于多倍體的原因可能會引起體細胞克隆變異(soma-clonalvariation)現象。換句話說,單細胞再生的植株在遺傳上并非純合體,因為在組織培養中生長的植物細胞遺傳上似乎是不穩定的,這在基因轉移實驗中是非常嚴重的問題。最后一個不足發生在農業生產上占據非常重要地位的植物諸如玉米、水稻和小麥上。這些都是單子葉植物,而應用在雙子葉植物上非常有效的DNA載體系統對它們的應用卻非常困難。在后續部分將提到,為了克服這一障礙發明的一些新方法。
10.1.2原生質體再生植株
對遺傳學家來講,植物所具有一個非常有用的奇特現象是單個細胞可再生成一個完整的植株(但是請記住,這種技術的應用價值因體細胞克隆變異將受到限制)。當植物受到機械損傷時,在損傷處將長出一片軟細胞稱作愈傷組織(callus)。若將一片幼嫩的愈傷組織取下并放置于含有適當營養成分和植物激素的培養基中、培養,細胞將繼續生長和分化成為懸浮培養物(懸浮在液體培養基中,含有單個細胞或小細胞團的培養物)。這些細胞取出后置于平板上,將形成新的愈傷組織。有時需要用其他細胞作為保育培養(nurseculture),相似于用作哺乳類細胞培養中的細胞滋養層。然后愈傷組織會分化出根和莖,最后生長成一個完整的開花植株。研究表明愈傷組織細胞的分化依賴于植物激素(phytohormones)-生長素(auxins)和細胞分裂素(cytokinins)的相對含量。當生長素與細胞分裂素的比值高時,植物的根發育;而當此比值低時,莖開始發育。
……