《分子生物學(xué)與檢驗技術(shù)(供檢驗技術(shù)專業(yè)用全國高職高專院校教材)》包括分子生物學(xué)概論和分子生物學(xué)常用檢驗技術(shù)兩大部分。基于前期對國內(nèi)醫(yī)院、第三方醫(yī)學(xué)檢測中心的調(diào)研分析,借鑒歐美國家分子診斷領(lǐng)域的應(yīng)用進(jìn)展,第二篇的內(nèi)容主要涉及聚合酶鏈擴(kuò)增、核酸雜交等檢驗技術(shù),以及單基因遺傳性疾病、病原性微生物和腫瘤個體化靶向治療有關(guān)的分子檢驗項目,并引入即將進(jìn)入醫(yī)學(xué)檢驗領(lǐng)域的下一代測序技術(shù)等內(nèi)容,以增加教材的實用性和新穎性。分子生物學(xué)檢驗技術(shù)雖然具有特異性好、靈敏度高和針對性強等優(yōu)點,但存在技術(shù)門檻較高、操作復(fù)雜等特點。有別于分子生物學(xué)基礎(chǔ)研究的是,分子生物學(xué)檢驗需要一個完善的質(zhì)量保證體系,以確保方法、試劑和操作規(guī)程的標(biāo)準(zhǔn)化和檢驗結(jié)果的一致性。因此,本教材第二篇還包含了分子生物學(xué)實驗室質(zhì)量保證等方面的內(nèi)容。
第一篇 分子生物學(xué)基本概論
第一章 緒論
第一節(jié) 分子生物學(xué)的興起與發(fā)展
一、分子生物學(xué)發(fā)展歷程及其主要的里程碑
二、臨床分子生物學(xué)檢驗技術(shù)的發(fā)展與進(jìn)步
第二節(jié) 分子生物學(xué)檢驗技術(shù)的主要任務(wù)
一、分子生物學(xué)檢驗技術(shù)的理論基礎(chǔ)
二、分子生物學(xué)檢驗技術(shù)的分析對象
第三節(jié) 分子生物學(xué)檢驗技術(shù)的臨床應(yīng)用前景
第二章 核酸和蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)與功能
第一節(jié) 蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)和功能
一、蛋白質(zhì)的基本組成
二、蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)
三、蛋白質(zhì)的功能
第二節(jié) 核酸的結(jié)構(gòu)與功能
第一篇 分子生物學(xué)基本概論
第一章 緒論
第一節(jié) 分子生物學(xué)的興起與發(fā)展
一、分子生物學(xué)發(fā)展歷程及其主要的里程碑
二、臨床分子生物學(xué)檢驗技術(shù)的發(fā)展與進(jìn)步
第二節(jié) 分子生物學(xué)檢驗技術(shù)的主要任務(wù)
一、分子生物學(xué)檢驗技術(shù)的理論基礎(chǔ)
二、分子生物學(xué)檢驗技術(shù)的分析對象
第三節(jié) 分子生物學(xué)檢驗技術(shù)的臨床應(yīng)用前景
第二章 核酸和蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)與功能
第一節(jié) 蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)和功能
一、蛋白質(zhì)的基本組成
二、蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)
三、蛋白質(zhì)的功能
第二節(jié) 核酸的結(jié)構(gòu)與功能
一、核酸的分類、分布與生物學(xué)功能
二、核酸的結(jié)構(gòu)與功能
三、核酸的重要理化性質(zhì)
第三節(jié) 現(xiàn)代遺傳中心法則
一、DNA的生物合成
二、RNA的生物合成
三、蛋白質(zhì)的生物合成
第三章 基因與基因組學(xué)
第一節(jié) 基因與基因組的概念
一、基因的分子生物學(xué)定義
二、基因組
第二節(jié) 原核生物基因組
一、原核生物基因組一般特征
二、質(zhì)粒
三、大腸桿菌基因組
第三節(jié) 真核生物基因組
一、真核生物基因組一般特征
二、細(xì)胞質(zhì)基因組特征
第四節(jié) 病毒基因組
一、病毒基因組的特征
二、DNA病毒
三、RNA病毒
第四章 癌基因和抑癌基因
第一節(jié) 細(xì)胞周期與細(xì)胞凋亡
一、細(xì)胞周期及其控制點
二、細(xì)胞凋亡與調(diào)控
第二節(jié) 癌基因和抑癌基因
一、癌基因
二、抑癌基因
第三節(jié) 腫瘤的發(fā)生與相關(guān)檢驗
一、腫瘤的發(fā)生
二、腫瘤的相關(guān)檢驗
第二篇 分子生物學(xué)常用檢驗技術(shù)
第五章 核酸的分離與純化技術(shù)
第一節(jié) 核酸的分離與純化技術(shù)
一、標(biāo)本
二、方法和試劑的選擇
三、技術(shù)路線
四、樣品鑒定與保存
第二節(jié) DNA的分離與純化
一、基因組DNA的分離與純化
二、質(zhì)粒DNA提取與純化
三、DNA片段回收
第三節(jié) RNA的分離與純化
一、RNA提取的特殊要求
二、RNA的提取與純化
三、RNA評價與鑒定
第六章 PCR技術(shù)與DNA序列測定
第一節(jié) 聚合酶鏈反應(yīng)
一、PCR的基本原理
二、PCR反應(yīng)體系和反應(yīng)條件
三、基于PCR的相關(guān)技術(shù)
四、實時熒光定量PCR技術(shù)在分子診斷中的主要應(yīng)用
第二節(jié) DNA序列測定
一、DNA序列測定
二、二代測序技術(shù)及其臨床應(yīng)用
三、DNA序列測定的應(yīng)用
第七章 核酸分子雜交技術(shù)
第一節(jié) 分子雜交的基本原理及主要類型
一、核酸分子雜交的基本原理
二、探針
三、分子雜交的類型及主要步驟
四、核酸分子雜交條件及優(yōu)化
第二節(jié) 熒光原位雜交技術(shù)的臨床應(yīng)用
一、FISH技術(shù)在產(chǎn)前診斷中的應(yīng)用
二、FISH技術(shù)在惡性腫瘤的分子診斷中的應(yīng)用
第八章 重組DNA技術(shù)
第一節(jié) 常用的工具酶
一、限制性核酸內(nèi)切酶
二、DNA連接酶
三、其它常用的酶類
第二節(jié) 常用的載體
一、克隆載體
二、表達(dá)載體
三、穿梭載體
第三節(jié) DNA重組的基本步驟
一、目的基因的獲取
二、目的基因和載體的酶切
三、目的DNA與載體的連接
四、重組DNA導(dǎo)入宿主細(xì)胞
五、重組子的篩選和鑒定
第四節(jié) 重組DNA技術(shù)的應(yīng)用
一、DNA重組技術(shù)促進(jìn)了人類對遺傳信息的認(rèn)識
二、采用DNA重組技術(shù)生產(chǎn)藥物與疫苗
第九章 蛋白質(zhì)分離技術(shù)
第一節(jié) 蛋白質(zhì)的分離與純化
一、分離純化策略
二、樣品的前處理
三、低分辨率操作單元
四、高分辨率操作單元
五、蛋白質(zhì)的分析鑒定
第二節(jié) 蛋白質(zhì)工程
一、蛋白質(zhì)工程及其應(yīng)用
二、抗體工程
第十章 分子生物學(xué)檢驗技術(shù)的臨床應(yīng)用
第一節(jié) 對病原微生物相關(guān)疾病的診斷
一、對病毒感染性疾病的診斷
二、對細(xì)菌感染性疾病的診斷
三、對其它病原生物感染性疾病的診斷
第二節(jié) 在人類基因組相關(guān)疾病診斷中的應(yīng)用
一、對單基因病的診斷
二、在多基因病中的應(yīng)用
第三節(jié) 在惡性腫瘤個體化治療方面的應(yīng)用
一、惡性腫瘤常規(guī)化療相關(guān)的分子診斷一
二、惡性腫瘤靶向藥物有關(guān)的分子診斷
第四節(jié) 對移植配型和個體識別方面的應(yīng)用
一、移植配型中的應(yīng)用
二、個體識別方面的應(yīng)用
第十一章 臨床PCR檢驗實驗室質(zhì)最保證
第一節(jié) 臨床PCR檢驗標(biāo)本的采集和質(zhì)量控制
一、標(biāo)本的類型
二、標(biāo)本的采集
三、標(biāo)本的運送
四、標(biāo)本驗收、拒收
五、標(biāo)本的預(yù)處理和保存
六、標(biāo)本提取核酸的保存
第二節(jié) 臨床PCR檢驗的室內(nèi)質(zhì)量控制
一、測定前質(zhì)量控制
二、測定中質(zhì)量控制
三、測定后質(zhì)量控制
四、室內(nèi)質(zhì)量控制的局限性
第三節(jié) 臨床PCR檢驗的室間質(zhì)量控制
一、概念
二、條件
三、EQA的工作流程
四、實驗室評分方法
五、室間質(zhì)量評價的局限性
附錄 實訓(xùn)指導(dǎo)
實訓(xùn)項目一 微量移液器的使用
實訓(xùn)項目二 肝組織基因組DNA的抽提
實訓(xùn)項目三 基因組DNA樣品的純度和濃度鑒定
實訓(xùn)項目四 應(yīng)用PCR—RFLP方法進(jìn)行苯丙酮尿癥的分子檢驗-苯丙氨酸羥化酶(PAH)第11外顯子C1068A點突變的檢測
實訓(xùn)項目五 結(jié)核分枝桿菌分子檢驗
實訓(xùn)項目六 子宮頸HPV感染的分子檢驗
實訓(xùn)項目七 慢性粒細(xì)胞白血病Abl基因突變檢驗
實訓(xùn)項目八 總RNA分離和純化
實訓(xùn)項目九 總RNA樣品的鑒定
實訓(xùn)項目十 乳腺癌曲妥珠單抗(赫賽汀)靶向治療的分子檢驗
參考答案
中英文名詞對照索引
參考文獻(xiàn)