目錄
第一篇 生物化學與分子生物學實驗基本要求
第一章 實驗室安全規則 1
第一節 實驗規則 1
第二節 實驗室安全和注意事項 2
第三節 應急處理 2
第二章 實驗設計與實驗報告 4
第一節 實驗設計 4
第二節 實驗記錄及實驗報告 5
第三節 實驗誤差 6
第四節 有效數字 8
第三章 實驗化學試劑 9
第四章 實驗室的基本操作 13
第一節 玻璃器皿的洗滌 13
第二節 溶液的常規操作 16
第三節 實驗常用標本的制備 17
第四節 常用實驗器材的使用 20
第二篇 實驗室常用基本技術
第五章 離心技術 24
第六章 分光光度技術 28
第七章 層析技術 32
第一節 吸附層析 32
第二節 分配層析 33
第三節 離子交換層析 33
第四節 凝膠過濾層析 34
第五節 親和層析 35
第八章 電泳技術 38
第一節 概述 38
第二節 醋酸纖維素薄膜電泳 40
第三節 SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳 42
第四節 瓊脂糖凝膠電泳 44
第五節 其他電泳 46
第六節 電泳后大分子的檢測 47
第九章 聚合酶鏈式反應(PCR) 50
第一節 一般聚合酶鏈式反應 50
第二節 反轉錄PCR 52
第三節 實時熒光定量PCR 53
第四節 原位PCR 55
第五節 PCR擴增產物分析 56
第十章 生物大分子的制備 58
第一節 生物大分子制備的前處理 58
第二節 生物大分子的提取 60
第三節 生物大分子的分離和純化 61
第四節 冷凍干燥 63
第十一章 AC9000型電解質分析儀使用 66
第十二章 DS-3C微量元素檢測儀的使用 70
第一節 概述 70
第二節 DS-3C微量元素檢測儀的使用 70
第十三章 Bio-Rad分子成像系統 79
第一節 Image Lab操作手冊 79
第二節 免染總蛋白技術操作和分析指南 88
第三篇 生物化學與分子生物學實驗項目
第十四章 蛋白定量測定 91
第一節 酚試劑法(改良Lowry) 91
第二節 紫外分光光度法 93
第三節 改良微量凱氏定氮法 94
第四節 考馬斯亮藍法 95
第五節 雙縮脲法 97
第十五章 蛋白醋酸纖維素薄膜電泳 99
第十六章 SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳測定蛋白質分子量 103
第十七章 凝膠層析法測定蛋白質分子量 108
第十八章 乳酸脫氫酶同工酶測定 111
第十九章 影響酶促反應速率的因素 113
第一節 pH和溫度對酶促反應的影響 113
第二節 激活劑和抑制劑對酶促反應的影響 114
第二十章 堿性磷酸酶米氏常數的測定 117
第二十一章 血清/尿淀粉酶測定 121
第一節 改良Winslow氏法 121
第二節 碘-淀粉比色法 122
第二十二章 血糖測定 124
第一節 鄰甲苯胺法 124
第二節 葡萄糖氧化酶法 125
第三節 尿糖的定性測定(班氏試劑法) 127
第二十三章 血脂測定 129
第一節 總膽固醇測定 129
第二節 甘油三酯測定 132
第三節 高密度脂蛋白測定(磷鎢酸-鎂沉淀法) 136
第四節 血清載脂蛋白的測定 137
第二十四章 超速離心法分離血漿脂蛋白 139
第二十五章 肝/尿中酮體的測定 141
第一節 肝中酮體的測定 141
第二節 尿中酮體的定性測定(Lange法) 142
第二十六章 血清氨基轉移酶測定 145
第一節 血清谷丙轉氨酶測定 145
第二節 血清谷草轉氨酶測定(賴氏法) 150
第二十七章 血清尿素氮測定 153
第一節 二乙酰-肟法 153
第二節 脲酶-比色法 154
第三節 酶偶聯速率法測定血清尿素 155
第二十八章 血清膽紅素測定 157
第一節 改良J-G法 157
第二節 膽紅素氧化酶法 159
第二十九章 提取基因組DNA(蛋白酶K消化法) 162
第三十章 提取人外周血基因組DNA 165
第一節 改良碘化鉀法 165
第二節 SDS裂解法 166
第三十一章 PCR擴增血液膽固醇酯轉運蛋白D442G 168
第三十二章 DNA的瓊脂糖凝膠電泳 170
第三十三章 快速質粒抽提及酶切鑒定 173
選擇題參考答案 176
參考文獻 178