《生物化學實驗（第二版）》在第一版的基礎上，根據應用中發現的問題及生物化學實驗的進展做了修改。全書分為四部分，包括44個實驗。基礎性實驗部分重在基本實驗技能的培訓；綜合性實驗部分著重實驗原理的應用和提高分析能力。這兩部分涵蓋了與生物化學理論相適應的生物化學實驗內容和技術，包括糖、脂、蛋白質、核酸、酶、維生素的分離、純化、定性或定量分析，功能和代謝的研究等。設計性實驗部分在前兩部分的基礎上為學生提供一個獨立實驗的空間，著重培養學生的獨立科研能力。附錄介紹了生物化學實驗室規則、實驗報告書寫、常用實驗室操作規范、試劑的配制和一些生物化學常用數據。
《生物化學實驗（第二版）》可作為普通高等師范院校及非師范院校本、專科生命科學各專業及農學、食品各專業的生物化學實驗教材，也可作為中學生物教師的參考用書。
第二版前言
第一版前言
第一部分 基礎性實驗
實驗1 紙層析法分離氨基酸
實驗2 醋酸纖維素薄膜電泳分離血清蛋白
實驗3 考馬斯亮藍染色法測定蛋白質含量
實驗4 酶的專一性
實驗5 酶反應動力學的影響因素
實驗6 RNA定量測定
實驗7 DNA定量測定(二苯胺法)
實驗8 紫外吸收法測定核酸含量
實驗9 DNA的瓊脂糖凝膠電泳
實驗10 肝糖原的提取和鑒定
實驗11 卵磷脂的提取和鑒定
實驗12 油脂酸價的測定 第二版前言
第一版前言
第一部分 基礎性實驗
實驗1 紙層析法分離氨基酸
實驗2 醋酸纖維素薄膜電泳分離血清蛋白
實驗3 考馬斯亮藍染色法測定蛋白質含量
實驗4 酶的專一性
實驗5 酶反應動力學的影響因素
實驗6 RNA定量測定
實驗7 DNA定量測定(二苯胺法)
實驗8 紫外吸收法測定核酸含量
實驗9 DNA的瓊脂糖凝膠電泳
實驗10 肝糖原的提取和鑒定
實驗11 卵磷脂的提取和鑒定
實驗12 油脂酸價的測定
實驗13 維生素C的定量測定(2,6-二氯酚靛酚滴定法)
實驗14 血清谷丙轉氨酶活力測定
第二部分 綜合性實驗
實驗15 SDS-PAGE測定蛋白質相對分子質量
實驗16 蛋白質印跡
實驗17 疏水層析分離純化α-淀粉酶
實驗18 小麥幼苗淀粉酶活性的測定
實驗19 正交法測定影響淀粉酶活力的幾種因素
實驗20 植物組織中過氧化物酶活力的測定
實驗21 乳酸脫氫酶活力測定
實驗22 酵母蔗糖酶的粗分離
實驗23 離子交換柱層析純化蔗糖酶
實驗24 蔗糖酶各級分活性及蛋白質含量的測定
實驗25 反應時間對產物形成的影響
實驗26 小麥葉片淀粉酶Vmax和Km測定
實驗27 底物濃度對酶促反應速度的影響——米氏常數的測定
實驗28 小麥葉片淀粉酶抑制劑動力學反應
實驗29 質粒DNA的提取、酶切和鑒定
實驗30 大腸桿菌感受態細胞的制備
實驗31 小牛胸腺DNA的制備
實驗32 小牛胸腺DNA熔解溫度的測量
實驗33 植物基因組提取(CTAB法)
實驗34 蘿卜過氧化物酶基因rsprx1的擴增
實驗35 實時熒光定量PCR
實驗36 酵母RNA的提取與組分鑒定
實驗37 粗脂肪的定量測定
實驗38 丙二醛的測定
實驗39 發酵過程中無機磷的利用和ATP的生成(ATP的生物合成)
第三部分 設計性實驗
實驗40 蛋白質的沉淀反應和等電點測定
實驗41 目的基因的擴增與鑒定
實驗42 影響肝糖原含量的因素
實驗43 酶反應最適條件的選擇
實驗44 植物過氧化物酶同工酶聚丙烯酰胺凝膠電泳
主要參考文獻
附錄
一、實驗室規則
二、實驗報告書寫
三、常用實驗室操作規范
四、試劑的配制
第一部分 基礎性實驗
實驗1 紙層析法分離氨基酸
【實驗目的】
掌握分配層析的原理；學習氨基酸紙層析法的操作技術（包括點樣、平衡、展層、顯色、鑒定及定量）；學習未知樣品的氨基酸成分分析的方法（水解、層析及鑒定）。
【實驗原理】
層析法又叫色層分離法、色譜分析法或色譜法。1903年俄國化學家茨維特（M.Tswett）將葉綠素的石油醚溶液通過CaCO3管柱，并繼續以石油醚淋洗，由于CaCO3對葉綠素中各種色素的吸附能力不同，色素被逐漸分離，在管柱中出現了不同顏色的譜帶或稱色譜（chromatogram），因此稱為色層分離法。1931年有人用氧化鋁柱分離了胡蘿卜素的兩種同分異構體，顯示了這一分離技術的高度分辨力，從此引起了人們的廣泛注意。自1944年應用濾紙作為固定支持物的“紙層析”誕生以來，層析技術的發展越來越快，20世紀50年代開始，相繼出現了氣相色譜和高效液相層析，其他如薄層層析、親和層析、凝膠層析等也迅猛發展。層析分離技術操作簡便，樣品用量可大可小，既可用于實驗室分離分析，又適用于工業生產中產品的分析制備。層析法的最大特點是分離效率高，它能分離各種不同性質及類似的物質，而且既可以用于少量物質的分析鑒定，又可用于大量物質的分離純化制備。現已成為生物化學、分子生物學、生物工程等學科廣泛應用而又必不可少的分析工具之一。
根據固定相基質的形式分類，層析可以分為紙層析、薄層層析和柱層析。紙層析是指以濾紙作為基質的層析。薄層層析是將基質在玻璃、塑料或金屬板等光滑表面輔成一薄層，在薄層上進行層析。柱層析則是指將基質填裝在管中形成柱形，在柱中進行層析。
根據流動相的形式分類，層析可以分為氣相層析和液相層析。氣相層析是指流動相為氣體的層析，而液相層析是指流動相為液體的層析。
根據分離的原理不同分類，層析主要可以分為吸附層析、分配層析、凝膠過濾層析、離子交換層析、親和層析等。
紙層析所依據的原理是分配層析，故屬于分配層析的范疇。
（一）分配層析
分配層析法是利用不同的物質在兩個相混而互不相溶的溶劑中的分配情況不同而使之得到分離的方法。將分配層析法中的一種溶劑設法固定起來，再用另外一種溶劑來沖洗這個固定溶劑，同樣可達到將不同物質分離的目的。把固定起來的溶劑稱為固定相，把用作沖洗的溶劑叫做流動相。為了
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